Elisa試劑盒包被中所需條件?
今日,上海大學王琦同學向我司技術咨詢了elisa試劑盒在包被中所需要的條件?這種問題可能許多老師在實驗檢測中也有所疑問,對此,我司技術特別書面整理說包被及包被所需要的條件有哪些?方便今后客戶在遇到這類問題能夠及時的修正處理問題。
Elisa試劑盒在檢測中有一個詞叫包被,我們生物界將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。換言之,包被即是抗原或抗體結合到固相載體表面的過程。蛋白質與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結合的,靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用力。
那么Elisa試劑盒包被中所需要的條件是什么呢?
包被用抗原或抗體的濃度,包被的溫度和時間,包被液的pH等應根據試驗的特點和材料的性質而選定。抗體和蛋白質抗原一般采用pH9.6的碳酸鹽緩沖液作為稀釋液,也有用pH7.2的磷酸鹽緩沖液及pH7~8的Tris-HCL緩沖液作為稀釋液的。通常在ELISA板孔中加入包被液后,在4-8℃冰箱中放置過一夜,37℃中保溫2小時被認為具有同等的包被效果。包被的zui適當濃度隨載體和包被物的性質可有很大的變化,每批材料需通過實驗與酶結合物的濃度協調選定。一般蛋白質的包被濃度為100ng/ml-20ug/ml。
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